Instituto de Biotecnolog’a, INTA Castelar. Argentina.
RESUMEN (ABSTRACT)
La integraci—n de estrategias derivadas de la gen—mica, transcript—mica y metabol—mica para el estudio de relaciones huŽsped-pat—geno, permite abordar la caracterizaci—n de la resistencia en sistemas complejos. La base genŽtica de la resistencia al pat—geno necrotr—fico Sclerotinia sclerotiorium, agente causal de la podredumbre del cap’tulo en girasol, es poligŽnica, habiŽndose identificado varios loci de car‡cter cuantitativo (QTL) espec’ficos de genotipo, —rgano y condiciones ambientales de crecimiento. Esto ha limitado la generaci—n de germoplasma resistente por mŽtodos convencionales, requiriendo la aplicaci—n de herramientas derivadas de nuevas disciplinas. En este trabajo se abord— una estrategia integrada incluyendo el mapeo de QTLs sobre poblaciones biparentales, que permiti— identificar al menos tres QTLs asociados al car‡cter; la identificaci—n de nuevos genes candidatos a travŽs de la construcci—n de colecciones ADN substractivas a distintos tiempos post infecci—n; la identificaci—n de cambios concertados de perfiles metab—licos y hormonales en genotipos resistentes y susceptibles en respuesta al pat—geno; la caracterizaci—n estructural y funcional de cinco miembros de la familia de genes de germinas en girasol, asociados a defensa a pat—genos. Asimismo, mediante una estrategia de mapeo por asociaci—n, analizando 16 genes candidatos sobre una colecci—n de 100 genotipos de girasol caracterizados para respuesta al pat—geno, se identific— un alelo asociado al car‡cter. Finalmente, se gener— una micromatriz de oligonucle—tidos representando 42.000 unigenes que permitir‡, juntamente con la utilizaci—n de estrategias de secuenciaci—n masiva identificar perfiles transcripcionales. El an‡lisis integrado de datos de transcript—mica y metabol—mica contribuir‡ a esclarecer los mecanismos de resistencia a este hongo, y fortalecer‡ la selecci—n de genes candidatos robustos para el desarrollo ulterior de marcadores funcionales.