REDBIO México 2010

Folio: 615
Tipo de presentación: Cartel
Tema: Transformación Genética de Plantas

Novedoso Método de Transformación Genética de Células de Nicotiana tabacum en Suspensión con Nanotubos de Carbono

O. E. Ochoa Olmos * (1), M. de J. Jiménez Villalobos (1), M. Teresa de J. Olvera Flores (1), E. V. Basiuk (2), T. D. Dinkova (1).
* Autor para correspondencia (Corresponding author) kaosdoubt@hotmail.com

1- Facultad de Química, Conjunto E, Universidad Nacional Autónoma de México (UNAM), Ciudad Universitaria, 04510 México D.F., México; 2- Centro de Ciencias Aplicadas y Desarrollo Tecnológico, Universidad Nacional Autónoma de México (UNAM), Ciudad Universitaria, 04510 México D.F., México

RESUMEN (ABSTRACT)
"La pared celular en plantas dificulta el empleo de los métodos convencionales de transformación con DNA, obstaculizando estudios genéticos y biotecnológicos importantes. Las metodologías con las que se cuentan son mediante Agrobacterium tumefaciens, el virus del mosaico del tabaco, biobalística y transformación transitoria en protoplástos. Sin embargo, éstas presentan limitaciones, como es el rango restringido de especies para transformar. Los nanotubos de carbono (CNTs) son nanoestructuras cilíndricas formadas por átomos de carbono, que gracias a sus peculiares propiedades físico-químicas han sido propuestos para el desarrollo de diversas aplicaciones bionanotecnológicas. Recientemente, debido a su capacidad de atravesar la membrana celular libremente vía endocitosis, se han utilizado CNTs para la entrega de ácidos nucléicos en células de mamífero. Se emplearon CNTs de pared múltiple (MWCNTs) funcionalizados con diferentes aminas: 1,8- diamino-octano (DO), octadecil amina (ODA), polietilen glicol diamina (PEG-DA) y polietilenimina (PEI), para llevar a cabo la transformación genética de células de Nicotiana tabacum en suspensión, con el plásmido nCBP-GFP que codifica para la proteína novedosa de unión a Cap (nCBP) fusionada a la proteína verde fluorescente (GFP) bajo el promotor constitutivo 35S del virus del mosaico de la coliflor. Las observaciones realizadas por microscopia confocal, revelan que las células incubadas a 48 hs en presencia de MWCNTs-funcionalizados y DNA plasmídico expresan dicho plásmido exitosamente, indicando que los MWCNTs-funcionalizados son capaces de entregar al interior de éstas ácidos nucléicos. Esto abre posibilidades para el desarrollo de nuevos métodos biocompatibles de transformación en plantas basados en nanoestrucutras de carbono. Este trabajo fue apoyado por los proyectos CONACYT 81708 y PAPIIT IN204309"