REDBIO México 2010
Folio: 605
Tipo de presentación: Oral
Tema: Otro
Este trabajo se presentará en "Presentaciones Libres 19: Agrobiotecnolog’a" el dentro del horario
DESARROLLO DE FITASAS TEMOESTABLES RECOMBINANTES PARA SU APLICACIîN EN LA TECNOLOGêA DE ALIMENTOS Y NUTRICIîN ANIMAL
JosŽ M. Viader-Salvad— (1), Juan A. Gallegos-L—pez (1), Lil’ Rodr’guez-Blanco (1), J. Gerardo Carreon-Trevi–o (1), Miguel Castillo-Galv‡n (1), JosŽ A. Fuentes-Garibay (1), A. Ricardo Garc’a-Arellano (1), Eddy L. Cab-Barrera (1), Mar’a M. Iracheta-C‡rdenas (1), L. Elizabeth Cruz-Su‡rez (2), Martha Guerrero-Olazar‡n * (1).
* Autor para correspondencia (Corresponding author) martha.guerrerool@uanl.edu.mx
1- Instituto de Biotecnolog’a, Facultad de Ciencias Biol—gicas, UANL, Av. Pedro de Alba s/n Col. Cd. Universitaria, San Nicol‡s de los Garza, N.L. MŽxico 66450; 2- Programa Maricultura, Facultad de Ciencias Biol—gicas, UANL, Av. Pedro de Alba s/n Col. Cd. Universitaria, San Nicol‡s de los Garza, N.L. MŽxico 66450
RESUMEN (ABSTRACT)
Las fitasas incrementan la disponibilidad de f—sforo y otros minerales debido a la hidr—lisis del ‡cido f’tico presente en ingredientes vegetales. La mayor’a de las fitasas comerciales son activas a pH ‡cido y no resisten las altas temperaturas durante el procesado de alimentos. Las fitasas con estructura de hŽlice del gŽnero Bacillus son termoestables y activas a intervalos amplios de pH y temperatura. En este trabajo se construyeron cepas de levaduras capaces de producir una fitasa de Bacillus subtilis (PhyC-R) y una fitasa (FTEII) con estructura de hŽlice dise–ada de novo por ingenier’a de prote’nas. Se desarroll— un bioproceso para la producci—n a escala de laboratorio y se evalu— el potencial de aplicaci—n de estas enzimas. Las cepas de Pichia pastoris construidas fueron capaces de producir ambas fitasas con niveles de hasta 80,000 U/L y secretar hasta el 92% de las mismas. Ambas fitasas mostraron estar N-glicosiladas, con actividad a intervalos amplios de pH (2.5 a 9) y temperatura (25 a 70¡C), adem‡s de ser m‡s termoestables (actividad residual de 85 ± 2%) que las fitasas comerciales en tratamientos a 80¼C por 10 min. Todas las fitasas fueron estables a las enzimas digestivas de camar—n (Litopenaeus vannamei) y tripsina porcina. En tratamientos de pasta de soya y un concentrado proteico de ch’charo con ambas fitasas, se liber— hasta un 68 y 57% del f—sforo total respectivamente, el doble que en los tratamientos con las fitasas comerciales. Ambas fitasas ofrecen alternativaS viableS para ser aplicadas en la tecnolog’a de alimentos y nutrici—n animal.
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