REDBIO México 2010

Folio: 572
Tipo de presentación: Oral
Tema: Gen—mica
Este trabajo se presentará en "Presentaciones Libres 1: îmicas" el Lunes dentro del horario 16:30 a 18:30

"AISLAMIENTO, CLONACIîN Y CARACTERIZACIîN DEL gDNA Y cDNA QUE CODIFICAN PARA DOS NUEVAS PROTEASAS DE Jacaratia mexicana"

Erick M. Ramos Martinez * (1), Jesśs A. Badillo Corona (1), Claudio Garibay Orijel (1), Ma. Del Carmen Oliver Salvador (1).
* Autor para correspondencia (Corresponding author) erickmiguel8@hotmail.com

1- Depto. Bioprocesos, Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnolog’a, Av. Acueducto s/n, Barrio La Laguna, Col. Ticom‡n, MŽxico, D.F., C.P. 07340

RESUMEN (ABSTRACT)
"Las proteasas ciste’nicas adem‡s de estar involucradas en procesos fisiol—gicos son de interŽs ya que son utilizadas en las industrias alimentaria, farmacŽutica y biotecnol—gica. Jacaratia mexicana, una planta silvestre que posee las proteasas ciste’nicas mexica’na y quimomexica’na, las cuales tienes propiedades que le permiten competir con la papa’na. En el presente estudio se busco aislar los genes que codifican para algunas de estas proteasas ciste’nicas. Se extraj— el DNA y RNA total de hojas de J. mexicana. Utilizando el RNA se realiz— la s’ntesis de cDNA, y se amplific— una regi—n interna del gen usando primers degenerados para los sitios conservados de las proteasas ciste’nicas. A partir de este fragmento interno se dise–aron primers para aislar el gen completo usando la tŽcnica de 5Ő y 3Ő RACE. La secuencia completa del cDNA fue utilizada para dise–ar primers para amplificar los genes a partir del gDNA de la planta. Se determin— la secuencia de dos ORF a partir de cDNA: isomex1 e isomex2 con 1297 bp y 1300 pb respectivamente, los cuales codifican para una prote’na con un pŽptido se–al de 26 amino‡cidos, un propeptido de 108 amino‡cidos y una prote’na madura de 214 amino‡cidos para la isomex1 y 215 amino‡cidos para la isomex2. Los alineamientos demuestran alta similitud con otras proteasas ciste’nicas de origen vegetal as’ como la conservaci—n del plegamiento y de los residuos involucrados en el sitio activo. Cuando se determin— la secuencia de nucle—tidos a partir de gDNA se observ— que ambos genes contienen tres intrones."


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