REDBIO México 2010
Folio: 536
Tipo de presentación: Oral
Tema: Otro
Este trabajo se presentará en "Presentaciones Libres 19: Agrobiotecnolog’a" el dentro del horario
Generaci—n y purificaci—n de anticuerpos policlonales espec’ficos contra la γ-kafirina del sorgo (Sorghum vulgare L.)
Margarita Berenice Medina-Arriaga (1), JosŽ Luis Anaya-L—pez * (2), V’ctor Pecina-Quintero (2), V’ctor Montero-Tavera (2), Noe Montes-Garc’a (2), Alejandra Ochoa-Zarzosa (3).
* Autor para correspondencia (Corresponding author) jose.luis.al@hotmail.com
1- Instituto Tecnol—gico de Celaya. Av. Tecnol—gico y A. Garc’a Cubas s/n. A.P. 57, C.P. 38010, Celaya, Guanajuato, MŽxico; 2- Instituto Nacional de Investigaciones Forestales Agr’colas y Pecuarias. Campo Experimental Baj’o. Km 6.5 Carretera Celaya-San Miguel de Allende, Apartado Postal 112, Celaya, Guanajuato, MŽxico; 3- Centro de Estudios Multidisciplinarios en Biotecnolog’a, Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad Michoacana de San Nicol‡s de Hidalgo, Apartado Postal 53, Administraci—n Chapultepec, 58262, Morelia, Michoac‡n, MŽxico
RESUMEN (ABSTRACT)
"Las prolaminas del sorgo constituyen del 70 al 80% de las prote’nas totales del grano y se clasifican en α-, β- y γ-kafirinas. Algunas evidencias sugieren que la digestibilidad del grano de sorgo disminuye debido al alto contenido de estas prote’nas. El objetivo de este trabajo fue generar y purificar anticuerpos policlonales espec’ficos contra la γ-kafirina del sorgo œtiles en el estudio de la expresi—n de esta prote’na mediante an‡lisis tipo Western Blot. Para la producci—n del ant’geno se extrajeron las kafirinas totales a partir de grano de sorgo maduro de acuerdo al protocolo de El Nour et al, (1998), y se enriqueci— la fracci—n de γ-kafirina de acuerdo con Watterson et al, (1990) con algunas modificaciones. El perfil de las kafirinas extra’das se determin— mediante SDS-PAGE. Para la producci—n de los anticuerpos se usaron conejas de la raza nueva Zelanda de 6 semanas de edad que fueron inmunizadas con el fragmento de acrilamida correspondiente a la banda de γ-kafirina (28 kDa) triturada en PBS. La reacci—n espec’fica de los anticuerpos con la γ-kafirina se determin— mediante an‡lisis Western Blot. La fracci—n de inmunoglobulinas G (IgG) se purific— mediante cromatograf’a de afinidad con sefarosa-prote’na A y se comprob— por SDS-PAGE. Se lograron obtener y purificar los anticuerpos policlonales espec’ficos a la γ-kafirina del sorgo usando la fracci—n enriquecida, con la fracci—n completa de kafirinas no se produjeron anticuerpos con una marca adecuada. Estos anticuerpos son una herramienta œtil para el estudio y an‡lisis de expresi—n de la γ-kafirina."
Regresar al Indice