REDBIO México 2010

Folio: 490
Tipo de presentación: Cartel
Tema: Otro

Los cultivos de tabaco in vitro como plataforma de producci—n de protrombina.

Zaldśa Z (1), Cragnaz L (1), Nelson G (1), Calcaterra J (2), Marconi P (1), Velander W (2), Alvarez MA * (1).
* Autor para correspondencia (Corresponding author) malvarez@conicet.gov.ar

1- Instituto de Ciencia y Tecnolog’a Dr. CŽsar Milstein- CONICET. Saladillo 2468 (1440) Ciudad de Buenos Aires Argentina ; 2- Department of Chemical and Biomolecular Engineering, University of Nebraska-Lincoln, Lincoln, NE 68588, USA

RESUMEN (ABSTRACT)
"El proceso de hemostasia en general se completa en pocos minutos. No obstante, si la herida es extensa, es necesaria la aplicaci—n de agentes o dispositivos hemost‡ticos. La trombina es un potente y ampliamente usado agente hemost‡tico que se aplica en la herida mediante esponjas o vendajes hemost‡ticas. La trombina es el factor coagulante que se activa en śltima instancia y el śnico capaz de clivar el fibrin—geno para formar fibrina y activar las plaquetas que se agregan y adhieren a la herida. Estos procesos resultan en la formaci—n del co‡gulo que actuar‡ como tap—n deteniendo la hemorragia. Actualmente se producen vendajes hemost‡ticos utilizando trombina de origen animal pero se est‡n analizando fuentes alternativas (ej. levaduras). Nosotros hemos logrado la expresi—n de protrombina IIa en cultivos in vitro vegetales de tabaco lo que representa una plataforma alternativa que permite su producci—n sin los riesgos inherentes a los asociados a los productos de origen animal disminuyendo as’ sus costos. Por otra parte la producci—n se realiza en condiciones controladas, sustentable y amigable con el medio ambiente. Para ello se transform— tabaco mediante el sistema Agrobacterium. La secuencia de 864 pb de la protrombina fue clonada en un cassette que porta el promotor constitutivo CaMV 35S, la secuencia se–al 2S2 y la se–al de direccionamiento a ret’culo endopl‡smico KDEL. La eficiencia del proceso fue del alrededor del 80%, se confirm— por Western blot la integridad de la prote’na, obteniŽndose rendimientos que oscilan entre 1.5-2.4% de prote’na total soluble."


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