REDBIO México 2010

Folio: 465
Tipo de presentación: Cartel
Tema: Biodiversidad

MARCADORES RAPD PARA ESTUDIAR LA DIVERSIDAD BIOLOGICA DE Dolichos lablab EN VENEZUELA

Efraín G. Salazar * (1), Delis Pérez (1), Margaret Gutiérrez (1), Luis Castro. (1).
* Autor para correspondencia (Corresponding author) efra63@gmail.com

1- Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias (INIA-CENIAP). Zona Universitaria vía El Limón. Edif 09. Maracay 2101, Venezuela

RESUMEN (ABSTRACT)
"Chivata (Dolichos lablab L.) es una leguminosa presente en zonas altas del occidente y andes de Venezuela. Es importante para la alimentación campesina, pero actualmente pocos conuqueros la cultivan. Es un recurso local en riesgo de erosión genética, siendo necesaria su conservación y análisis de la diversidad genética en los materiales colectados. El INIA-CENIAP tiene una colección ex situ de chivata caracterizada convencionalmente, siendo importante el uso de técnicas moleculares para complementar la información genética y entender la diversidad genética conservada. El ADN se aisló de hojas jóvenes de 12 genotipos de Dolichos, usando el método Dellaporta modificado (CIAT, 1998). Las amplificaciones tuvieron 10 ng de ADN, 1 u de Taq ADN polimerasa, 113 µM de cada dNTP, 0,8mM de un primer 10 mer y 26,66 mg/µl BSA. Las condiciones de RAPD comenzaron a 94°C por 5 min, seguido por 40 ciclos a 93°C por 30s, 36°C por 30s y 72°C por 1 min, y una extensión final a 72°C por 7 min. Los productos amplificados fueron separados electroforéticamente en geles de Agarosa 1.5% y se visualizaron bajo luz UV previa tinción con Bromuro de Etidio. Se realizó un análisis de Conglomerado Jerárquico usando la distancia de Dice y el método de agrupamiento de Ward para datos no estandarizados. Los RAPDs permitieron producir un patrón de banda para cada material estudiado confirmando la utilidad de la técnica. Los materiales se separaron en dos grandes grupos, mostrando un alto nivel de polimorfismo, indicando una alta diversidad genética en las poblaciones colectadas."