REDBIO México 2010


Folio: 417
Tipo de presentación: Oral
Tema: Micropropagaci—n y Cultivo De Tejidos
Este trabajo se presentará en "Presentaciones Libres 12: Micropropagaci—n, Cultivo de Tejidos y Transformaci—n" el Jueves dentro del horario 11:40 a 13:20

Inducci—n de Ra’ces Transformadas en Hyptis suaveolens para la Producci—n de Podofilotoxina y/o Lignanos Citotoxicos

Crescencio Bazaldœa * (1), Jesœs Arellano (2), Mar’a Luisa Villarreal (1).
* Autor para correspondencia (Corresponding author) cbazaldua@uaem.mx

1- Centro de Investigaci—n en Biotecnolog’a. Universidad Aut—noma del Estado de Morelos, Av. Universidad 1001, Cuernavaca, Mor. MŽxico.; 2- Centro de Ciencias Gen—micas, UNAM. Av. Universidad 1001, Cuernavaca, Mor. MŽxico.

RESUMEN (ABSTRACT)
"La podofilotoxina es un lignano natural que se emplea para semisintetizar f‡rmacos anticancer’genos. Las especies vegetales utilizadas para obtener este compuesto son escasas. La especie mexicana Hyptis suaveolens produce podofilotoxina, la cual se acumula principalmente en las ra’ces. El objetivo del presente trabajo fue inducir ra’ces transformadas, de H. suaveolens, hiperproductoras de podofilotoxina o sus derivados, mediante la infecci—n de explantes con las cepas ATCC 15834 y K599pTDT, de Rhizobium rhizogenes. Para generar las ra’ces transformadas, se infectaron 960 explantes (hojas, tallos, ra’ces, yemas e hipoc—tilos). La brotaci—n de ra’ces en hojas se logr— cuando el co-cultivo se realiz— en MS suplementado con ANA y BAP (2 y 1 mgL-1, respectivamente); en los otros explantes, las ra’ces brotaron aœn cuando el co-cultivo se realiz— en MS sin fitohormonas. El porcentaje m‡s alto de inducci—n de ra’ces se observ— en yemas e hipoc—tilos (13%) y el m‡s bajo en hojas (5%). Por el tiempo de duplicaci—n, se seleccionaron cuatro l’neas de ra’ces y se subcultivaron cada 20 d’as en medio B5 l’quido, en condiciones de agitaci—n constante. Todos los experimentos se mantuvieron en luz continua a 24±1¡C. La confirmaci—n de la transformaci—n genŽtica de las ra’ces seleccionadas se realiz— al observar fluorescencia y mediante PCR y la identificaci—n de lignanos por CLAE." Los extractos clorof—rmicos de las ra’ces seleccionadas y de los medios de cultivo mostraron actividad citot—xica en cuatro l’neas celulares tumorales humanas (KB, MCF 7 HF 6 y PC 3) con valores de ED50 entre 1.48 y 11.86ug/ml."


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