REDBIO México 2010
Folio: 348
Tipo de presentación: Cartel
Tema: Mejoramiento GenŽtico Vegetal
Promotores espec’ficos de semilla: Aislamiento y caracterizaci—n funcional de dos promotores de girasol.
Diego Zavallo ¥ Marisa Lopez Bilbao ¥ H. Esteban Hopp ¥ Ruth Heinz
Instituto de Biotecnolog’a CNIA INTA CC25 Castelar Buenos Aires, Argentina
RESUMEN (ABSTRACT)
"El objetivo de este trabajo es identificar y caracterizar funcionalmente promotores de girasol capaces de dirigir la expresi—n de un transgŽn a semilla. Para ello, se seleccionaron dos genes de girasol (HaFAD2-1 y HaAP10) previamente descriptos como de expresi—n en semilla. En primer lugar se realizaron ensayos de Northern blot de los dos genes en distintos tejidos y —rganos de girasol con el fin de determinar el patr—n espacial y temporal de expresi—n de dichos genes. Ambos transcriptos se detectaron s—lo en semillas de girasol presentando distintos niveles de expresi—n a lo largo del desarrollo y maduraci—n de las mismas. Mediante caminado cromos—mico se aislaron dos fragmentos de 867pb y 964pb r’o arriba de los genes HaFAD2-1 y HaAP10 respectivamente. Se realizaron construccions en vectores de expresi—n con el gen reportero GUS y se transformaron plantas de A. thaliana. Se evaluaron 2 l’neas por cada construcci—n adem‡s de un control con el promotor 35S de expresi—n constitutiva mediante tinci—n histoqu’mica y por fluorometr’a. Las plantas transformadas con los promotores espec’ficos no presentaron tinci—n ni actividad fluoromŽtrica en ningœn tejido vegetativo, detectandose la expresi—n del transgŽn s—lo en el embri—n..En cuanto a los niveles de expresi—n se pudo determinar mediante ensayos de fluorometr’a que el promotor de HaFAD2-1 es significativamente m‡s fuerte que el de HaAP10 (Zavallo y col. 2010). En este trabajo se han obtenido dos promotores de expresi—n fuerte y espec’fica de semilla los cuales representan potenciales herramientas biotecnol—gicas para la modificaci—n de semillas en plantas de interŽs agron—mico."
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