REDBIO México 2010

Folio: 322
Tipo de presentación: Cartel
Tema: Transformación Genética de Plantas

Mejora de la transformación de girasol por un cambio de promotor.

Laura M. Radonic * (1), Nilda E. López (1), H. Esteban Hopp (1), Marisa López Bilbao. (1).
* Autor para correspondencia (Corresponding author) lradonic@cnia.inta.gov.ar

1- Instituto de Biotecnología, CNIA, INTA Argentina

RESUMEN (ABSTRACT)
"Con la finalidad de comprobar si alguna de las dificultades observadas en la transformación de girasol se debía a la utilización del promotor constitutivo de origen viral CaMV35S, se realizaron ensayos de transformación estable de girasol con dos construcciones las cuales diferían sólo en el promotor que regulaba la expresión del gen reportero de la betaglucuronidasa (GUS) en el vector Gateway pKGWFS7,0: CaMV35S-omega TMV (utilizado en toda la bibliografía existente en transformación de girasol) y rbcS1 (subunidad pequeña de la ribulosa-1,5-bifosfato carboxilasa). El vector utilizado posee además el gen nptII de resistencia a kanamicina bajo la regulación del promotor nos. Los resultados obtenidos en los ensayos de transformación estable mostraron que el uso del promotor rbcS1, en comparación al CaMV35S-omega TMV, no solo aumentó los niveles de expresión de GUS sino que modificó la expresión del gen nptII, mejorando notoriamente la eficiencia de transformación (de 2,23 % a 7,06 %). Además, mejoró la respuesta y el aspecto de las plantas obtenidas (T0) al ser transferidas al invernáculo (tanto por pasaje a tierra directo como por injerto), siendo éstas de gran porte y con capítulos florales más grandes, que resultaron en un aumento del número y tamaño de los aquenios obtenidos. Resultados similares fueron publicados en Arabidopsis donde el promotor CaMV35S afectaba y alteraba en trans el patrón de expresión de transgenes y cambiaba el fenotipo de las plantas transgénicas. El análisis de las plantas T1 permitió observar altos niveles de expresión del gen reportero, comparable al de otras especies vegetales."