REDBIO México 2010


Folio: 216
Tipo de presentación: Cartel
Tema: Transformaci—n GenŽtica de Plantas

GENERACIîN DE LINEAS TRANFORMADAS T0 DE FRIJOL COMòN (Phaseolus vulgaris L. cvs. Flor de Mayo Anita y Pinto Saltillo) CON EL GEN FUSIîN TPS1-TPS2 DE LEVADURA (Saccharomyces cerevisiae) PARA CONFERIR TOLERANCIA A ESTRƒS HêDRICO.

Anareli Quintero-JimŽnez (1), Gabriel Iturriaga-de la Fuente (2), Elsa Espinosa-Huerta (1), Jorge Acosta-Gallegos (1), Cesar Aguirre-Mancilla (3), RubŽn Paredes-Uribe (3), Mar’a Alejandra Mora-AvilŽs * (1).
* Autor para correspondencia (Corresponding author) mora.alejandra@inifap.gob.mx

1- Instituto Nacional de Investigaciones Forestales Agr’colas y Pecuarias (INIFAP) Campo Experimental Baj’o, Unidad de Biotecnolog’a, Km 6.5 Carr. Celaya-San Miguel de Allende, C.P. 38110. Celaya, Gto., MŽxico. ; 2- Universidad Aut—noma del Estado de Morelos (UAEM). Centro de Investigaci—n en Biotecnolog’a, Av. Universidad 1001, Col. Chamilpa, C.P. 62210 Cuernavaca, Mor. MŽxico; 3- Instituto Tecnol—gico de Roque (ITR). Km 8 Carr. Celaya-Juventino Rosas. Col. Roque. C.P. 38110. Celaya, Gto., MŽxico

RESUMEN (ABSTRACT)
"El estrŽs h’drico es uno de los limitantes m‡s importantes para la productividad y el rendimiento del frijol. La transformaci—n genŽtica de este cultivo puede ayudar a obtener l’neas tolerantes a este estrŽs. Transformar frijol comœn mediante Agrobacterium tumefaciens con el gen fusi—n TPS1-TPS2 (Trehalosa-6-fosfato sintasa - Trehalosa-6-fosfato fosfatasa) de levadura que participa en la ruta de bios’ntesis de la trehalosa, representa una alternativa para conferir tolerancia a estrŽs h’drico. Se aislaron y cultivaron embriones de frijol del cultivar Flor de Mayo Anita (FMA) y Pinto Saltillo (PS); durante 5 d’as en medio s—lido Gamborg (GM) adicionado con 10 mg/L de Benciladenina y se disectaron para obtener hipocotilos. Estos se inocularon en una diluci—n de GM l’quido y A. tumefaciens (TPS1-TPS2). Los explantes permanecieron en cocultivo (GM + 200µM acetosiringona) durante 3 d’as y en medio de eliminaci—n (ME) (GM + 300 mg/L de Timentina) durante 5 d’as. Se transfirieron a medio de selecci—n (ME+50 mg/L de Kanamicina) con transferencias cada 10 d’as. Los ejes embrionarios del cultivar FMA mostraron formaci—n de conglomerados celulares a los 3 d’as despuŽs de su inoculaci—n (DDI) y PS a los 6 d’as DDI. La formaci—n de brotes en FMA ocurri— a los 12 DDI y en PS a los 14 d’as. De los explantes de FMA y PS transferidos a medio de selecci—n el 60% y 40% respectivamente, resultaron resistentes a Kanamicina (Kan), evidenciando la generaci—n de plantas transformadas. An‡lisis moleculares de las plantas resistentes a Kan para definir presencia del gen y su nivel de expresi—n se encuentran en proceso."


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