REDBIO México 2010
Folio: 195
Tipo de presentación: Cartel
Tema: Transformaci—n GenŽtica de Plantas
An‡lisis de la estabilidad del transplastoma para la eliminaci—n de genes marcadores de selecci—n por repetidos invertidos en plantas transplast—micas
Sugey Ramona Sinagawa Garc’a * (1), Tarinee TungsuchatHuang (2), Octavio Paredes L—pez (3), Pal Maliga (2).
* Autor para correspondencia (Corresponding author) ssinagawa@gmail.com
1- Facutlad de Agronom’a, Campus de ciencias Agropecuarias, Universidad Aut—noma de Nuevo Le—n, Francisco Villa s/n Ex hacienda el Canada C.P. 66050 Escobedo N.L. MŽxico ; 2- Waksman Institute, Rutgers, The State University of New Jersey, 190 Frelinghuysen Road, Piscataway, NJ 08854-8020, USA ; 3- Depto. De Biotecnolog’a y Bioqu’mica, Centro de Investigaci—n y de Estudios Avanzados del IPN, Apdo. Postal 629, 36500 Irapuato, Gto., MŽxico
RESUMEN (ABSTRACT)
"Las transformaci—n genŽtica de cloroplastos es una opci—n muy atractiva para aplicaciones biotecnol—gicas porque presenta diversas ventajas como: altos niveles de expresi—n, la posibilidad de eliminar genes marcadores de selecci—n. Existen dos sistemas para la escisi—n del marcador basados en las recombinasas de los fagos phiC31 y P1. El objetivo del presente trabajo fue probar si la escisi—n del gen marcador ocurre en ausencia de las recombinasas en el transplastoma cuando est‡ flanqueado por las regiones de recombinaci—n. Se dise–aron los vectores pSS33 y pSS42 con el gen bar (barau) flanqueado por los sitios attP/attB y loxP de las recombinasas INT y CRE, respectivamente. Las plantas transformadas con estos vectores presentan un fenotipo amarillo y cuando se lleva a cabo la escisi—n del gen barau se presenta la formaci—n de sectores verdes en las hojas. Los resultados obtenidos fueron que de aproximadamente 36,00 pl‡ntulas germinadas de Nt-pSS33 el gen barau estuvo presente en todos los genoma plast’dicos, lo que indic— que genomas plast’dicos donde el gen marcador est‡ flanqueado por los sitios attP/attB son estables en la ausencia de la recombinasa INT. Por otro lado, de aproximadamente 38,000 pl‡ntulas germinadas de Nt-pSS42 solamente seis plantas presentaron pigmentaci—n uniformemente verde. El an‡lisis de secuenciacion de estas plantas indic— la pŽrdida del gene barau y del gen de selecci—n aadA por un proceso llamado conversi—n del gen concluyendo que transplastomas que contienen genes flanqueados por sitios de las recombinasas son estables a menos que las recombinasas sean introducidas dentro de los pl‡stidos."
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