REDBIO México 2010
Folio: 135
Tipo de presentación: Oral
Tema: Mejoramiento GenŽtico Vegetal
Este trabajo se presentará en "Presentaciones Libres 11: Biodiversidad, Mejoramiento y Marcadores Moleculares" el Miercoles dentro del horario 14:20 a 16:20
Nudos cotiledonales como blanco para la transformaci—n genŽtica v’a Agrobacterium tumefaciens en Phaseolus vulgaris L. var. CIAP 7247
R. Collado * (1), L. R. Garc’a (1), G. Angenon (2), I. BermœdezCaraballoso (1), N. Veit’a (1), D. Torres (1), C. Romero (1), N. Bacallao. (1).
* Autor para correspondencia (Corresponding author) raulc@ibp.co.cu
1- Instituto de Biotecnolog’a de las Plantas, Universidad Central ÒMarta AbreuÓ de Las Villas. Carretera a Camajuan’ km 5.5, Santa Clara, Villa Clara. Cuba; 2- Instituut Voor Moleculaire Biologie en Biotechnologie. Vrije Universiteit Brussel. Belgium
RESUMEN (ABSTRACT)
"El frijol (Phaseolus vulgaris L.), representa una de las mayores fuentes cal—rico-proteica para millones de personas. Esta especie, presenta dificultades para la transformaci—n genŽtica, pasando por problemas como la falta de reproductibilidad, aplicabilidad y baja eficiencia. En el Instituto de Biotecnolog’a de las Plantas se ha logrado tener un elevado porcentaje de regeneraci—n organogŽnica v’a directa en un importante cultivar cubano. Esto permiti— desarrollar un trabajo con el objetivo de aplicar el nudo cotiledonal como explante blanco para la transformaci—n genŽtica v’a Agrobacterium tumefaciens en Phaseolus vulgaris L. var. CIAP 7247. Los nudos cotiledonales fueron inoculados con la cepa de Agrobacterium tumefaciens EHA101, portando un vector binario con los genes, nptII como marcador de selecci—n y gusINT para chequear expresi—n GUS. Varios par‡metros relacionados con la transferencia de ADN v’a Agrobacterium tumefaciens tales como, concentraci—n de la bacteria, temperatura, fotoper’odo y per’odo de co-cultivo, y la concentraci—n de Acetosyringona fueron definidos. La temperatura, el fotoper’odo y el per’odo de co-cultivo tuvieron un efecto significativo en la transferencia de ADN v’a Agrobacterium tumefaciens. Adem‡s la adici—n de acetisyringona al medio de cultivo para la inducci—n de la bacteria increment— la expresi—n GUS en nudos cotiledonales. Sin embargo, las concentraciones de la bacteria estudiadas no presentaron diferencias significativas. Combinando los mejores resultados de cada par‡metro evaluado, fue establecido un procedimiento para la transferencia de ADN v’a Agrobacterium tumefaciens en Phaseolus vulgaris L. var. CIAP 7247. Este protocolo puede ser aplicado para analizar otros par‡metros en la transformaci—n genŽtica de esta especie."
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